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EV 외부의 DNase 전처리로 EV RNA 수율 향상

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  소개 세포외 소포체 (EV) 는 기원 세포에서 유래한 microRNA(miRNA) 및 mRNA 를 포함한 RNA 를 포함하는 것으로 알려져 있습니다 . EV RNA 연구는 EV 의 세포 소스 결정 , 질병 진단 및 발암성 RNA 식별과 같은 다양한 목적에 유용할 수 있습니다 . EV 는 직경이 ~30-200nm 로 매우 작기 때문에 분리 및 분석할 수 있는 RNA 화물의 양이 제한될 수 있습니다 . 따라서 가능한 한 적은 수의 EV 에서 RNA 를 효율적으로 정제할 수 있는 강력한 방법을 갖는 것이 바람직합니다 . Biotium 은 EV 에서 모든 크기의 RNA 를 높은 수율로 분리하기 위해 ExoBrite™ EV Total RNA Isolation Kit 를 개발했습니다 . RNA 외에도 EV 에도 DNA 가 포함되어 있다는 보고가 있는 경우가 있습니다 . 그러나 대부분의 최근 간행물에서는 EV 에서 분리된 DNA 가 EV 루멘 내부가 아니라 EV 외부에 있다고 제안합니다 (Ref. 3). RNA 분리 키트를 개발하는 과정에서 특히 DNase 처리가 수행되지 않은 경우 세포 배양 유래 EV 에서 RNA 와 함께 공동 분리된 많은 양의 DNA 에 놀랐습니다 . 우리는 이 DNA 가 EV 외부에 있는지 , 그렇다면 RNA 분리 전에 EV 에서 제거할 수 있는지 궁금했습니다 . 당사의 EV 제제에서 분리된 DNA 가 EV 외부 ( 예 : cell-free DNA) 라는 가설을 테스트하기 위해 , RNA 분리를 위한 EV 용해 전에 비오틴화 테트라스파닌 항체에 결합된 Biotium 의 ExoBrite™ Streptavidin Magnetic Beads 에서 캡처한 EV 의 DNase 처리를 수행했습니다 . 회수된 RNA 의 수율을 DNase 로 처리하지 않은 EV 의 수율 및 EV 용해 후 일반적인 온 - 컬럼 DNase 처리를 거친 샘플과 비교했습니다 . 그런 다음 Bio...