라벨이 CellBrite Steady 550인 게시물 표시

3D Human Retinal Organoid에서 보는 AAV 유전자 전달

이미지
 Biotium NucSpot® Live 650 & CellBrite® Steady 550 활용 사례 👁️🧬 안녕하세요, 고마바이오텍입니다😊 오늘은 Biotium에서 소개한 흥미로운 응용 사례를 하나 공유드리려고 합니다.  유전자 치료가 빠르게 발전하면서, AAV(adeno-associated virus) 같은 바이러스 벡터가 실제 인간 조직 안에서 어떻게 퍼지고, 어떤 세포에 얼마나 잘 들어가는 지를 정량적으로 이해하는 일이 점점 더 중요해지고 있습니다.  특히 human retinal organoid는 사람의 망막 층 구조와 세포 구성을 잘 모사하는 강력한 모델이지만, 조직이 두껍고 빛을 많이 산란 시키는 특성 때문에 그 안에서 일어나는 AAV transduction을 단일 세포 수준에서 기존의 핵/세포막 염색으로 분석하는 데에는 다음과 같은 큰 제한이 있습니다. 🔹기존 핵 염색(DNA dye)의 한계      1. 깊은 층까지 신호가 잘 전달되지 않고,     2. photobleaching과 cytotoxicity가 문제가 되며,     3. 여러 날에 걸쳐 반복 이미징을 하기에는 안정성 부족       👉 오가노이드 전체를 대상으로 세포 segmentation을 수행하기 어려움  🔹기존 세포막 염색(membrane dye)의 한계     1. 오가노이드 내부로의 침투가 불충분     2. 라벨링이 균일하지 않고     3. 시간이 지나면 내포작용(endocytosis)으로 빠르게 사라짐        👉 세포 윤곽을 장기간 유지하면서 라이브 상태로 관찰하기 어려움